柱色谱常用的填料有哪些（色谱柱填料的处理方法及原因）

本文目录一览：

• 1、色谱法简介
• 2、简述中性氧化铝柱色谱分离化学成分的原理及应用
• 3、聚酰胺柱色谱分离黄酮类化合物的规律
• 4、液相色谱的色谱柱规格有哪些?
• 5、气相色谱柱老化怎么办?
• 6、薄层色谱层析的固定相到底是什么??另外柱色谱(分配色谱)呢?纸色谱...

色谱法简介

1、色谱法（chromatography）又称“色谱分析”、“色谱分析法”、“层析法”，是一种分离和分析方法，在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。

2、色谱法（又称层析法）根据其分离原理可分为：吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等。吸附色谱法是利用被分离物质在吸附剂上被吸附能力的不同，用溶剂或气体洗脱使组分分离；常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。

3、又称层析法或色层法，是一种利用物质的溶解性、吸附性等特性的物理化学分离方法。其分离原理是根据混合物的各组分在互不相溶的两相（称为固定相和流动相）作用的差异作为分离依据的。

简述中性氧化铝柱色谱分离化学成分的原理及应用

中性氧化铝 （pH 7-5）适用于醛、酮、醌、苷和硝基化合物以及在碱性介质中不稳定的物质如酯、内酯等的分离，也可以用来分离弱的有机酸和碱等。⑵硅胶： 硅胶是硅酸的部分脱水后的产物，其成分是SiO2·xH2O，又叫缩水硅酸。柱色谱用硅胶一般不含粘合剂。

实验原理：利用甲基橙和亚甲基蓝在中性氧化铝的保留时间差异，实现二者的分离。所用色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管，下端用棉花或玻璃纤维塞住，管内装有吸附剂。色谱柱的大小，吸附剂的品种和用量，以及洗脱时的流速，均按各单体中的规定。

常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙和活性炭等。吸附剂一般要经过纯化和活性处理，颗粒大小应当均匀。对于吸附剂而言，粒度愈小表面积愈大，吸附能力就愈高，但颗粒愈小时，溶剂的流速就太慢，因此应根据实际分离需要而定。供柱色谱使用的氧化铝有酸性、中性、碱性三种，本实验选择中性氧化铝。

取一根带玻璃活塞的色谱柱，将其固定在铁架上。在柱内加入3ml的乙醇，打开活塞，放出乙醇，然后再加入乙醇至距色谱柱的下端的棉花1-50px处，关闭活塞。取中性氧化铝（100-.. 取一根带玻璃活塞的色谱柱，将其固定在铁架上。

聚酰胺柱色谱分离黄酮类化合物的规律

聚酰胺柱色谱分离黄酮类化合物的规律如下：分子中酚羟基数目越多则吸附力越强，在色谱柱上越难以被洗脱。与酚羟基位置有关，如所处位置易于形成分子内氢键，则吸附力减小，在色谱柱上易洗脱。分子内芳香化程度越高，共轭双键越多，则吸附力越强，在色谱柱上难洗脱。

吸附原理：一般认为是通过分子中的酰胺羰基与酚类、黄酮类化学物的酚羟基，或酰胺键上的游离胺基与醌类、脂肪羧酸形成氢键缔合而产生吸附。2）吸附强弱的规律 ① 形成氢键的基团数目越多，则吸附能力越强。②成键位置对吸附力也有影响。形成分子内氢键者，其在聚酰胺上的吸附即相应减弱。

聚酰胺柱色谱分离黄酮类化合物的原理是氢键吸附，影响其洗脱顺序的因素有：酚羟基的数目和位置，母核的芳香化程度；洗脱剂的极性等。

聚酰胺色谱特别适合于黄酮类的制备分离。聚酰胺对一般酚类、黄酮类化合物的吸附是可逆的（鞣质例外），分离效果好，加以吸附容量又大，故聚酰胺色谱特别适合于该类化合物的制备分离。

一）柱色谱法 硅胶柱色谱法 适于分离异黄酮，二氢黄酮（醇）和高度甲基化或乙酰化的黄酮及黄酮醇类。分离苷元时：氯仿-甲醇混合溶剂洗脱。分离苷时：氯仿-甲醇-水或乙酸乙酯-丙酮-水 聚酰胺柱色谱 适于黄酮类化合物的分离。

因此，聚酰胺吸附色谱特别适合分离酚类、醌类和黄酮类化合物。聚酰胺对被分离物质吸附力的大小取决于被分离物质分子结构中可与聚酰胺形成氢键缔合的基团数目及氢键作用强度。

液相色谱的色谱柱规格有哪些?

1、液相色谱柱就填料来说，可分为C1C氰基等反相柱以及硅胶等正相柱，其中以C18和硅胶柱最常用；就粒径来说有5u、3u、7u等，又以5u最为常用；就长度来说大致可以分为：50 、100、150、200、250、300等多种规格，其中150和250mm两种规格是最常用。

2、液相色谱柱型号为6x250mm：则代表内径（直径）=6mm，则半径=3mm，长度=250mm，所以其柱体积为V=14*3*3*250=4156立方毫米，换算成ml为15265ml，即液相色谱柱6x250mm的一个柱体积为15265ml（在基本不考虑柱死体积的情况下）。

3、代表柱子的内径（即直径）为120毫米。5：代表柱子的有效长度为5厘米。AP：代表柱子的填料类型，这里的AP可能指的是Amino-Propyl（氨基丙基）填料，也可能是其他类型的填料，具体需要根据柱子的使用说明或生产厂家提供的资料来确认。液相色谱柱是一种用于分离、纯化和分析化学混合物的重要工具。

4、Bio-C18色谱柱 Bio-C18填料有200和300两种孔径规格，适合于肽段的指纹图谱识别，天然和人工合成多肽以及低分子量蛋白等的分离。所采用的化学键合技术可以确保ODS单分子层不会在纯水溶液中发生塌陷。

5、液相色谱：液相色谱柱的选择比较复杂。我通常根据样品的具体结构和性质都采用C18来实验如果保留时间过晚就要采用C8柱子。基本上通常的反相色谱C8和C18就解决了大部分问题。有时一些特殊结构的样品也要采用胺基，苯基，或腈基柱。

6、mm代表色谱柱长度，6代表色谱柱内径，5m代表色谱柱填料颗粒直径 色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。

气相色谱柱老化怎么办?

1、填充柱的老化：制备一个填充柱色谱柱，需要选择合适的柱管，决定固定相俗称填料的种类，以及用于固定填料的填充物，如玻璃毛、石英棉、或者金属网等。最常用的柱管是不锈钢柱管和玻璃柱管，不锈钢柱管以其耐用，绕制方便成为柱管的首选材料。但是对于极性物质有吸附作用，这需要更惰性的玻璃柱管来替代。

2、第一种是直接用老化温度老化，适合经常性的短时间清理柱子用。第二种方法用程序升温法，用5度每分钟的速率升到老化温度后保持半小时再降到初始温度，然后再升温到老化温度。反复两次。后一种方法适合系统性的柱子维护。如果色谱柱使用时间较长，样品较脏，并且，进样口一端已经黑了。

3、实验方法：很多的时候，一提到柱效低就会想起色谱柱不行。其实可能是实验方法不行。调节pH值，调节溶剂，使用缓冲盐，扫尾剂等就可以提高柱效。比如碱性化合物，它的色谱峰就是会拖尾，会很难看，如果你更换了碱性化合物的色谱柱，那么柱效就会有明显提高。

4、如果是新柱子老化，最好断开色谱柱进行 如果是日常老化，可以不断开 具体的情况可能会有这样的几种：填充柱，新柱子，这个时候断开检测器比较安全。使用ECD检测器，因为检测器比较灵敏，有污染基线比较高，甚至无法检测，所以一定要断开检测器，用死堵把检测器端堵住。

5、这时需要去除杂质，活化柱子（固定相）。具体程序如下：进样口260度，检测器270度，程序升温：50-100-150-200-250-260保持2小时，升温速率10℃/min，保持30-min，只有260度的时候保持120min，色谱柱不接检测器，放空。工作站准备就绪后，输入样品信息（活化柱子等信息）-点击开始，点GC开始。

6、主要看你的保存情况，一般如果没开封，或是没把柱两端的封口胶垫拿掉的话，那影响不会太多，你就按正常方法老化色谱柱就可以了。必要时，你可以对柱子进行柱效检测，以防止影响你样品正常检测。

薄层色谱层析的固定相到底是什么??另外柱色谱(分配色谱)呢?纸色谱...

薄层色谱用的固定相是超细硅胶颗粒。一般用的是≥500目的硅胶。

薄层色谱用的固定相是超细硅胶颗粒。一般用的是≥500目的硅胶。（目，是颗粒大小的单位，目数越大颗粒越小）柱色谱主要有玻璃管柱、不锈钢柱和毛细管柱等。色谱法分类：气相色谱 在气相色谱中，以气体作流动相，以固定液或固体吸附剂作固定相。

色谱又称色层法或层析法，是一种物理化学分析方法，它利用不同溶质（样品）与固定相和流动相之间的作用力（分配、吸附、离子交换等）的差别，当两相做相对移动时，各溶质在两相间进行多次平衡，使各溶质达到相互分离。

·液固色谱法 ·液液色谱法 按固定相的几何形式 ·柱色谱法（column chromatography）柱色谱法是将固定相装在一金属或玻璃柱中或是将固定相附着在毛细管内壁上做成色谱柱，试样从柱头到柱尾沿一个方向移动而进行分离的色谱法。

【答案】：色谱法是一种分离方法，它利用物质在两项中分配系数的微小差异，当两相作相对移动时，使被测物质在两相之间进行反复多次分配，这样原来微小的分配差异产生了很大的效果，使各组分分离开来。

纸色谱法（filter paper chromatography）指的是把一种溶剂固定在固体的支持物（固定相）上，由于滤纸纤维对水有较强的亲和力，一般能吸附其自身质量22%的水，其中，6%的水以氢键与纤维素牢固结合，这些水即称为固定相。被水饱和的有机相（如正丁醇乙醚水系统）为流动相。