c18色谱柱用乙腈活化可以么（c18柱不能用纯乙腈洗脱）

本文目录一览：

• 1、液相色谱柱的保养方法?
• 2、C18色谱柱问题
• 3、碳18色谱柱适合用哪种溶剂冲柱子
• 4、C18色谱柱使用的日常注意事项有哪些

液相色谱柱的保养方法?

、液相色谱柱不使用或储存时，应封闭并储存在惰性溶剂中。

在条件允许的情况下，最好采用与色谱柱同种填料的固相萃取柱过滤进样溶液，可以减少在色谱柱上死吸附的物质或易堵塞的大分子样品。如生物样品中的小极性的油脂类易于沉淀死吸附在C18反相色谱柱中，导致柱效降低、柱压升高。

先以0.1~-0.2ml/min的流速冲洗，等看到有液体从柱子中流出后，持续10mins之后再接上检测器，以循序渐进方式将流速调至0ml/min（LC/MS柱子应以0.2ml/min的流速进行），继续活化2小时。

反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含缓冲盐的流动相，实验完成后应用20-30柱体积的甲醇或乙腈和水的50：50混合物进行冲洗。如需过夜保存，可将流速保持在 0.1 到 0.2 mL/min。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。

C18色谱柱问题

1、个柱体积不够，你是不是用酸碱盐了？你最好用甲醇（乙腈）-水 梯度100%-10 （每次梯度至少20min）反复洗涤，另外用乙腈保存比甲醇好。

2、可能是之前用的缓冲盐没有冲洗干净，现在盐析出了导致柱子堵了。可以用5%的甲醇水溶液低流速冲洗几天问题就可以解决。实在不行的话就反冲吧。

3、新C18色谱柱在使用前，须先用甲醇或乙腈试剂以20倍柱体积低流速冲洗，作用是使固定相能充分润湿、碳链舒展，使色谱柱的性能达到好状态。

碳18色谱柱适合用哪种溶剂冲柱子

用甲醇：水=50：50（v/v）冲洗柱子，每次使用后都保存在甲醇：水=50：50（v/v）的流动相中。色谱柱怕污染残留和柱压过高，残留每次使用后都用较高比例的有机相冲洗，然后在替换到50/50的甲醇/水中。柱压过高要尽可能避免。其他就没什么了，C18柱子也不贵，除了超高压UPLC用的柱子。

碳18柱是否能够继续使用，可以先用大极性溶剂冲柱，再上样品看柱效有无差异。例如碳18色谱柱就可以先用甲醇或乙腈小流速过夜冲柱，再进对照品或样品，查看色谱图和之前的由于明显差异。同时观察柱压，与之前的柱压有无明显差异。

冲洗碳十八色谱柱用异丙醇25%浓度左右的就很合适了，用高浓度的异丙醇可能会损伤十八色谱柱。

C18色谱柱使用的日常注意事项有哪些

1、新C18色谱柱在使用前，须先用甲醇或乙腈试剂以20倍柱体积低流速冲洗，作用是使固定相能充分润湿、碳链舒展，使色谱柱的性能达到好状态。

2、一要看清说明书后再使用 ，色谱柱内部保存着什么溶剂一定要看清楚，也包括说明书上建议的维护保养规定， 二要用纯水冲洗色谱柱才能把缓冲液冲洗干净 使用强溶剂冲洗色谱柱对内部填料的损伤是最大的，三要色谱柱应该保存在纯乙腈或甲醇中。

3、①避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使C18色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓（如前所述）。

4、第一，日常使用后就要清洗流路和柱子。第二，不同的柱子需用不同的溶剂清洗和保存。如，C8，C18等一般弱极性柱子的，先用90%的甲醇或乙腈和10%的水。

5、在条件允许的情况下，最好采用与色谱柱同种填料的固相萃取柱过滤进样溶液，可以减少在色谱柱上死吸附的物质或易堵塞的大分子样品。如生物样品中的小极性的油脂类易于沉淀死吸附在C18反相色谱柱中，导致柱效降低、柱压升高。

6、用甲醇：水=50：50（v/v）冲洗柱子，每次使用后都保存在甲醇：水=50：50（v/v）的流动相中。色谱柱怕污染残留和柱压过高，残留每次使用后都用较高比例的有机相冲洗，然后在替换到50/50的甲醇/水中。柱压过高要尽可能避免。其他就没什么了，C18柱子也不贵，除了超高压UPLC用的柱子。