waters新色谱柱活化步骤（waters spherisorb色谱柱）

本文目录一览：

• 1、高效液相色谱仪原理及操作步骤
• 2、waters高效液相色谱仪同分异构体如何计算如何积分
• 3、C18色谱柱的柱体积是多少
• 4、waters色谱柱如何活化

高效液相色谱仪原理及操作步骤

以液体为流动相而设计的色谱分析仪器称为液相色谱仪。采用高压输液泵，高效固定相和高压灵敏检测器等装置的液相色谱仪成为高效液相色谱仪。高效液相色谱仪种类繁多，但不论何种类型的高效液相色谱仪，基本上都分为4个部分：高压输液装置，进样系统，分离系统和检测系统。

高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

高效液相色谱仪操作流程为开机、超声、排气、走基线。开机前先将流动相过滤和超声：水流动相用混合滤膜（0.2μm）过滤，有机流动相用有机滤膜过滤，之后超声脱气15-20分钟。

液相色谱仪操作过程：开机操作：①打开液相色谱仪电源，用Harb相连接时，注意Harb电源，打开计算机，打开BootpServer（一般启动时已打开）。②自上而下打开个组件电源，BootpServer里显示有信号时（有六行字符），打开工作站（先打开Online）。

hplc原理及操作：储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内。由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别。

液相色谱仪操作及原理为利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定。

waters高效液相色谱仪同分异构体如何计算如何积分

waters高效液相色谱仪同分异构体的计算和积分通常需要经过以下步骤：确定需要分离和检测的同分异构体。这可以通过先前的实验或文献数据进行确定。选择和优化液相色谱柱和流动相条件，以确保同分异构体能够分离和检测。进行样品制备和处理，以确保样品能够正确地进入仪器并得到准确的检测结果。

高效液相色谱仪工作原理；高压泵将贮液罐的流动相经进样器送入色谱柱中，然后从检测器的出口流出，这时整个系统就被流动相充满。当欲分离样品从进样器进入时，流经进样器的流动相将其带入色谱柱中进行分离，分离后不同组分依先后顺序进入检测器，记录仪将进入检测器的信号记录下来，得到液相色谱图。

原理：高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论，色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成，造成的结果就是色谱柱的柱效远远高于原始的经典液相色谐，它柱子使用后还能具有高度灵敏度检测器。能够对流出来的分析物进行连续检测。

高效液相色谱的基本原理与构造利用“相似相容”这一核心概念，HPLC通过色谱柱将化合物分离得如丝般细腻。其构造宛如一台精密的科学交响乐团，由脱气机——泵——自动进样器——柱温箱——色谱柱——检测器，以及计算机数据处理系统组成，每一步都至关重要。

不可反控工作站通常是外挂式的，包含硬件和软件两大部分，硬件部分主要是一个A/D转换器，将高效液相色谱仪传输来的模拟信号转换成数字信号，再输进计算机；软件部分主要功能就是把硬件传输来的数字信号转换成图谱并进行积分计算等操作。 不可反控工作站的优点是通用性强，但是不可反控仪器、不便进行自动化操作。

C18色谱柱的柱体积是多少

HPLC系统操作规程的附录一上写清楚了，250*6mm色谱柱柱体积为2ml，新色谱柱平衡至少用10倍体积的流动相，以1ml/min的流速需要平衡42min。

液相色谱柱型号为6x250mm：则代表内径（直径）=6mm，则半径=3mm，长度=250mm，所以其柱体积为V=14*3*3*250=4156立方毫米，换算成ml为15265ml，即液相色谱柱6x250mm的一个柱体积为15265ml（在基本不考虑柱死体积的情况下）。

看你的说法，说的是柱内死体积，它一般等于柱体积的百分之三十。死体积包括从进样针到色谱柱，柱内死体积和色谱柱出口到流通池的体积之和。

这个不用多说了，就是常见的C1C氰基柱、苯基柱、氨基柱等等 规格。这些数据通常写在一起。比如5um，6mm*250mm。其中5um是填料的孔径。6mm是柱子的内径，250mm是柱长。通常柱长就是50mm、100mm、150mm、250mm几种。而柱子的内径大多都是6mm。

如果选择性仍和以前不一样，则表明还有其他杂质留在柱子里，这时应考虑更加严格的清洗：先用20倍柱体积的水，再用相同体积0.05mol/L硫酸，最后用流动相溶剂。酸洗常能洗下有机溶剂所不能洗下的剩余杂质。

waters色谱柱如何活化

用一个很小的一字螺丝刀（修手表那种），摁在塑胶上，另一头用火加热，螺丝刀热了会插入塑料里面，放冷，再旋出来。

若色谱柱长期保存未使用则刚装入HPLC系统时应以流量0.2mL/min平衡过夜注意断开检测器避免不必要的检测器耗损然后再以0.8mL/min流量平衡30分钟以上。以低流量缓慢的提高流速直到获得稳定的基线这样可以保证色谱柱的使用寿命。

是C18柱吗？原因大概有几种可能：1，上一次用了pH过大或过小的流动相，破坏了键合相，使峰形拖尾，这个原因不好补救。2，之前用了没有冲洗干净，解决办法是好好耐心的冲洗一下，实在不行可以选择倒冲。3，分析物是否与固定相上封尾不完全的硅羟基反应产生拖尾，这就与柱子本身无关了。

柱色谱为向玻璃管中填入固定相，以流动相溶剂浸润后在上方倒入待分离的溶液，再滴加流动相，因为待分离物质对固定相的吸附力不同，吸附力大的固着不动或移动缓慢，吸附力小的被流动相溶剂洗下来随流动相向下流动，从而实现分离。