c18色谱柱压力过高怎么处理（c18色谱柱适用范围）
- 仙侠奇缘
- 2024-06-26 03:00:21
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液相C18的长柱,柱压很高,怎么解决
1、可能是之前用的缓冲盐没有冲洗干净，现在盐析出了导致柱子堵了。可以用5%的甲醇水溶液低流速冲洗几天问题就可以解决。实在不行的话就反冲吧。
2、这个有多方面考虑因素，首先是管路问题，先断开色谱柱，如果发现压力还是大，那就是管路里有盐或者微生物堵塞，需要用强溶剂清洗，甲醇可以试试看。
3、如果你必须用甲醇做流动动相的话，建议通过提高柱温，和加大有机相比例，及力降流速的办法，把压力降下来。
新买的C18色谱柱在使用之前要怎样处理才能保护好它。
1、色谱柱怕污染残留和柱压过高，残留每次使用后都用较高比例的有机相冲洗，然后在替换到50/50的甲醇/水中。柱压过高要尽可能避免。其他就没什么了，C18柱子也不贵，除了超高压UPLC用的柱子。坏了就换新的呗，毕竟是消耗品。
2、⑤避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。⑥经常用强溶剂冲洗C18色谱柱，清除保留在柱内的杂质。
3、等度条件：使用缓冲盐前和使用后需用过渡流动相以0ml/min流速冲洗60min；使用后去除缓冲盐的另一个方法是用过渡流动相以0.2ml/min流速冲洗色谱柱过夜。
4、在条件允许的情况下，最好采用与色谱柱同种填料的固相萃取柱过滤进样溶液，可以减少在色谱柱上死吸附的物质或易堵塞的大分子样品。如生物样品中的小极性的油脂类易于沉淀死吸附在C18反相色谱柱中，导致柱效降低、柱压升高。
5、另外最后保存的时候一定要把柱子里灌满有机溶解（甲醇或乙腈），冲至平衡，一定不能留水在里面（尤其是酸性的水液）。20个柱体积不够，你是不是用酸碱盐了？你最好用甲醇（乙腈）-水 梯度100%-10 （每次梯度至少20min）反复洗涤，另外用乙腈保存比甲醇好。
液相的柱压不稳定,总是上下波动且幅度很大,可以怎么解决?
1、当液相柱压不稳定时可以进行以下操作：检查是否脱气，压力不稳定很可能是管路中有气泡。更换密封垫，泵密封垫损坏，会把空气带进泵内。打开泵的排气阀，按purge健排气，或者以大流速（2ml/m）排气，流动相真空脱气或者超声脱气。
2、． 泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理；2． 比例阀失效，更换比例阀即可；3． 泵密封垫损坏，更换密封垫即可；4． 溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法；5． 系统检漏，找出漏点，密封即可；6． 梯度洗脱，这时压力波动是正常的。
3、你可以跑一个单通道的流动相看看，建议跑纯有机相。如果压力还是不稳定，那么就是单向阀的问题了。拆下单向阀（主动阀和被动阀都要拆卸）然后拿去超声。再接上看看效果。如果纯甲醇没问题，换了双通道就不行，那么你的在线过滤装置可能是不太好。
4、原因有气泡，流动相脱气，并把液相系统排空 原因液相泵不好，流量不稳造成的压力不稳。
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